移液器在实验室中的使用技巧和注意事项

移液器具有一定量程范围, 可将液体从容器内吸出, 移入另一容器内的计量器具。移液器使用方便, 量程范围广, 移液准确度高, 是实验室不可缺少的移液助手。很多初次使用移液器的人, 总以为移液器的操作非常简单, 其实不然。移液器的操作是科学实验的第一步, 是非常基础的试验操作, 绝大多数人对于移液器的使用操作都有偏见和误区。移液器的正确使用, 直接影响实验的成功;有良好的移液操作规范, 可以改善移液的性能。

移液器为量出式量器, 分定量移液器和可调移液器两大类。型式有单头型和多头型。结构由显示窗、容量调节部件、活塞、活塞套、吸引管、吸液嘴等部分组成。

5 排液

(1) 排液时, 吸液嘴紧贴容器内壁并呈10°~20°夹角。

(2) 排出样品之后吸液嘴沿着容器内壁向上滑动, 避免液体残留在吸液嘴上。

(3) 排液完成后, 不要迅速放松活塞按钮, 远离样品之后松手, 按钮弹回。

6 移液器使用注意事项

6.1 关于温度

(1) 移液器的理想移液温度是21.5℃ (±1℃) , 在恒定温度下移液结果可改善5%。

(2) 建议移液器提前放入工作环境, 平衡20分钟, 使其温度和工作室温相同。

(3) 避免大幅度的温度变化和阳光照射。

(4) 微量移液器任何部分切勿用火烤, 亦不可吸取温度高于70℃的溶液, 避免蒸汽侵入腐蚀活塞。

(5) 长时间的移液, 手上的温度会使移液器变热, 内部空气膨胀, 导致结果不准确。

(6) 如果移液操作间隔较长, 将移液器放回支架上放置而不是一直握在手中。

6.2 关于保养

(1) 不要将移液器本身浸入样品溶液中, 造成移液器污染;如果液体不小心进入活塞室应及时清除污染物。

(2) 移液器使用完毕后, 将移液器量程调至最大值, 且将移液器垂直放置在移液器支架上。调到最大量程是为了让移液器里活塞的弹簧处于放松阶段, 活塞也会处于复原状态, 如果不调到最大量程会使活塞一直处于压力状态, 处于排液状态, 长时间会使弹簧寿命缩短, 如果是金属活塞, 可能造成生锈, 弹簧故障, 造成移液不准, 减少移液器寿命。

(3) 套有吸液嘴的移液器, 无论吸液嘴中是否有溶液, 均不可平放, 需垂直放置在移液器支架上。

(4) 移液器应进行定期计量检定校准, 至少一年一次。

(1) 装吸头; (2) 按需要设定量程;(3) 润洗吸头; (4) 吸液;(5) 排液; (6) 退吸头。

移液器使用技巧

1 吸液嘴

吸液嘴最好使用原装配置或者厂家推荐吸头, 吸液嘴的安装使用旋转法, 保证良好的密合性。如果是多道 (如8道或者12道) 移液器, 则可将移液器的第一道对准第一个吸液嘴, 然后倾斜地插入, 往前后摇动就可卡紧。吸液嘴卡紧的标志就是略微超过O型环, 并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。

2 调整量程

(1) 调整移液器量程时速度不宜过快, 避免计数器部件的磨损。

(2) 从大容积往小容积调节时, 按正常调节方法, 逆时针旋转旋钮, 直接调至所需量程即可。

(3) 在将量程从小容积调至高容积时, 先按顺时针旋转旋钮至超过所需量程的刻度, 然后再缓慢调整到所需容积。这样可以避免“机械回冲”, 确保更高的准确性。

(4) 在调整量程过程中, 千万不要将旋钮旋出量程, 否则会卡住内部机械装置而损坏移液器。

3 润洗

吸液前应对移液嘴进行润洗, 即吸液排液2-3次。润洗有助于吸头内壁易吸附, 可以使吸头内部空气温度和样品温度一致。润洗可以提高吸液的准确性和稳定性。

4 吸液

(1) 吸液时, 移液器侵入的角度与样品溶液保持垂直。

(2) 吸液时, 吸液嘴应侵入正确的深度, (1-10) μL的移液器侵入 (1-2) mm; (10-200) μL的移液器侵入 (2-3) mm; (200-2000) μL的移液器侵入 (3-6) mm;大于2000μL时侵入 (6-10) mm。吸头侵入太深容易吸入过多的溶液, 侵入过浅容易吸入空气, 不正确的侵入深度都会造成吸入量的不准确。

(3) 吸液时, 速度匀速、节奏一致, 快速和不稳定的吸液容易吸入空气、溶液喷溅、产生气雾, 溶液吸入套杆内, 造成移液器的污染。

(4) 吸液时, 手不要碰触吸液杆, 容易造成污染, 还易使吸液杆温度升高, 影响吸液。

(5) 吸液时, 根据不同的液体可选用不同的方法。对于一般的液体采用的是前进移液法, 用大拇指将按钮按至第一停点, 然后缓慢松开使按钮回到原点。接着将按钮按至第一停点排出液体, 稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体, 最后松开按钮。对于高粘度液体、生物活性液体、易气泡液体、极微量液体采用的是反向移液法, 就是先吸入多于设置量程的液体, 转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点, 缓慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体, 继续保持按住按钮位于第一停点, 千万不要再往下按, 取下有残留液体的吸液嘴。

(6) 吸液完成后, 移液器移出液面前略等待1-3秒。1000μL以下容积的移液器等待1秒, (5-10) m L等待2-3秒。

(7) 常用的空气置换式移液器可为日常液体移液过程提供很高的准确度, 为了在许多应用中提供更高的准确性, 建议使用外置活塞式移液器。外置活塞式移液器可准确转移易挥发溶液, 此类溶液通常会从空气置换式移液器的吸液嘴处泄漏。同样, 还可轻松转移非水性粘稠溶液和水性粘稠液, 如溶解在缓冲液中的羧甲基纤维素。另外置式活塞移液器还能处理非室温下的标准水性溶液, 而常规的空气置换式移液器无法在非室温下正常操作。外置活塞式移液器不依赖移液活塞与样品之间的气垫 。相反, 液体与毛细管吸头自身包含的一次性活塞直接接触, 不存在会伸缩的空气柱, 从而避免了缓慢吸入不完整或不准确的液体的可能性。吸取以下液体时, 外置活塞式移液器是最佳的选择:易挥发液体 (如, 乙腈、甲醇、乙醇等) ;非水性粘稠液体 (如, 甘油) ;水性或生物粘稠液体 (如, 稀释甘油、纯血、精液等) ;非理想条件 (如, 在4℃寒冷室内或37℃暖室内) 或与标准温度和压力条件存在差异的环境。